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萬柏隔水式細胞復蘇儀的原理過程分析

點擊次數(shù):1491 更新時間:2024-06-28
  萬柏隔水式細胞復蘇儀是通過快速融化的手段保證細胞外結(jié)冰晶在很短時間內(nèi)融化,避免由于緩慢融化使水分滲入細胞重新結(jié)晶對細胞造成損害,復蘇成功的細胞可以保持很高的活力。
 
  當溫度進一步下降,細胞內(nèi)外都結(jié)冰,產(chǎn)生冰晶損傷。但是如果在溶液中加入冷凍保護劑,則可保護細胞免受溶質(zhì)損傷和冰晶損傷。因為冷凍保護劑容易同溶液中的水分子結(jié)合,從而降低冰點,減少冰晶的形成,并且通過其摩爾濃度降低未結(jié)冰溶液中電解質(zhì)的濃度,使細胞免受溶質(zhì)損傷,細胞得以在超低溫條件下保存。
 
  在復蘇時,一般以很快的速度升溫,1-2 分鐘內(nèi)即恢復到常溫,細胞內(nèi)外不會重新形成較大的冰晶,也不會暴露在高濃度的電解質(zhì)溶液中過長的時間,從而無冰晶損傷和溶質(zhì)損傷產(chǎn)生,凍存的細胞經(jīng)復蘇后仍保持其正常的結(jié)構(gòu)和功能。
 
  冷凍保護劑對細胞的冷凍保護效果還與冷凍速率、冷凍溫度和復溫速率有關。而且不同的冷凍保護劑其冷凍保護效果也不一樣。
 
  冷凍保護體外培養(yǎng)物,除了必須有最佳的冷凍速率、合適的冷凍保護劑和凍存溫度外,在復蘇時也必須有最佳的復溫速率,這樣才能保證最后獲得最佳冷凍保存效果。復溫速率是指在細胞復蘇時溫度升高的速度。復溫速率不當也會降低凍存細胞存活率。一般來說,復溫速度越快越好。常規(guī)的做法是,在 370C 水浴中,于1-2分鐘內(nèi)完成復蘇。復溫速度過慢,細胞內(nèi)往往重新形成較大冰晶而造成細胞損傷。復溫時造成的細胞損傷非??欤跇O短的時間內(nèi)發(fā)生。
 
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